炉石传说砰砰计划攻略:分子生物學

質粒標準品構建服務

對于進行絕對實時熒光定量PCR實驗的研究人員來說,質粒的質量往往決定著實驗的成敗,因為需要質粒作為模板來制作標準曲線。

標準曲線的制備是絕對熒光定量PCR實驗的關鍵步驟,方法是先將測定基因的目的片段連接到載體中,然后轉化大腸桿菌,獲取陽性克隆,提取質粒,測定質粒濃度、計算其拷貝數。最后把質粒稀釋成不同濃度的標準品,依據這一系列標準品進行熒光定量PCR,獲得Ct值,然后擬合出標準曲線。

測定樣品時,標準品與未知樣品同時進行PCR循環,根據未知樣品的Ct值,結合標準曲線來求得未知樣品cDNA的起始拷貝數。

我們為您提供質粒標準品的構建服務,用于制作標準曲線,計算出基因的拷貝數。

實驗說明:

  1. 客戶應提供獲目的基因的序列。
  2. 客戶應提供實驗所需的原材料,如模板,引物,或者載體等。
  3. 客戶若只提供組織或者細胞,我們則需要提取RNA或者DNA,擴增出目的條帶后連接載體。
  4. 實驗周期:1-2周。

 

RNA提取服務

RNA 提取與純化技術是現代分子生物學技術的基礎,cDNA文庫構建、蛋白質體外翻譯、RNA序列分析及Northern Blot等都需要一定純度和完整性的RNA。完整性好和純度高是評價RNA質量的兩個關鍵標準。

要獲得完整的RNA取決于能否最低限度地避免純化過程中內源及外源性RNase對RNA降解;要獲得純度高的RNA取決于能否有效去除RNA提取中DNA和蛋白質。

騏驥公司技術人員經過多年的實驗和研究,探索出了提取高質量RNA的方法,不僅可以提取易于獲得RNA的動物細胞和組織的RNA,也可以經過短時間摸索提取復雜組織和樣品中的RNA。這種經驗和服務,將為您的下一步研究打下良好基礎,也能加速您的實驗進程。

樣品要求:

  1. 新鮮組織或者細胞
  2. 液氮保存的細胞或者組織
  3. 液氮速凍后放入-70度冰箱中保存的組織或者細胞(3個月內)

終產品:

  1. RNA樣品。
  2. 實驗報告,包括RNA濃度值、OD值和電泳照片。

 

 

DNA提取的技術服務

從細胞,組織中提取DNA,可用于后續的PCR、分子標記、文庫構建等實驗。

終產品:

  1. DNA樣品。
  2. 實驗報告,包括OD值和電泳圖片。

 

實時定量熒光PCR設計和服務

我們提供實時熒光定量PCR設計和服務,也提供從組織/細胞中的RNA提取、反轉錄和PCR以及檢測一條完整的服務途徑。

在實驗開展前,我們會和您溝通如何采樣、保存和運輸,設計出合理的PCR方案,優化實驗體系,獲得真實客觀的數據。

實驗結束后,也協助您進行數據分析。我們有多年的研究經驗,價格優惠合理,不僅做成熟的檢測,也可以和您一起進行探索性的研究。

因為實時熒光定量PCR具有很多優點,因此,被廣泛用于基因表達分析,基因分型,轉基因檢測等研究和應用。

實時熒光定量 PCR(Real time PCR) 是通過對 PCR 擴增反應中每一個循環產物的熒光信號進行實時檢測,從而實現對起始模板定量及定性的分析。在實時熒光定量 PCR 反應中,引入了一種熒光化學物質,隨著 PCR 反應的進行,PCR 反應產物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環,收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監測產物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線。常規PCR 中,擴增產物(擴增子)是通過終點法來分析檢測,即PCR 反應結束后,DNA 通過瓊脂糖凝膠電泳,然后進行成像分析。而熒光定量PCR 可以在反應進行過程中進行累積擴增產物的分析和檢測,即實現了“實時”。

實驗結束后,我們提供Ct值,擴增曲線,擴增效率,以及完整的實驗報告,包括實驗方法和實驗中涉及到的各種儀器和試劑。

備注:

  1. 我們免費為您進行內參基因的定量。
  2. 可提供相對定量和絕對定量的標準曲線,也可以為您提供或者構建用于絕對定量的質粒標準品。
  3. 可提供溶解曲線。
  4. 我們主要使用Roche LightCycler 480,LineGene 9600的qPCR儀器進行實驗,也可以根據實驗選擇ABI 7500,7900或者Qiagen Rotor Gene-Q。
  5. 實驗設計完成后,我們可在1-2周完成實驗。

 

2017年10月16日

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